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在一间经过精心设计的负压室里，空气完全通过门下面的一个缝隙(一般大约半英寸高)流入。除该缝隙外，这间负压室应该尽可能密封，以防止空气通过各种其它裂缝和缝隙进入，例如窗户四周的各种缝隙，墙上照明设备以及插座等。即使房间已经实现了负压条件，这些地方漏进的空气仍可能抵消或者消除房间的负压状态。
实现和维持房间负压以便空气流进房间所需的最小压力差非常小(水位表的0.001英寸)。实际实现的负压值取决于通风系统空气消耗量与供应量的差额以及房间的结构和大小，包括空气流动路径和流动开口。如果房间密封情况良好，则很容易实现高于0.001英寸水位表的负压值。但如果房间密封情况不佳，正如很多卫生机构的实际情况(特别是比较旧的医疗机构)，要实现较大的负压值可能需要排放量/供应量差值大于通风系统容量。
要在一间通风系统正常运行的条件下实现负压环境，首先调节房间的空气流动供应量与排放量，实现排放量比供应量高10%或者高50立方英尺/分钟(取决于较高值)即可。大多数情况下，这种标准就能够实现至少0.001英寸水位表的负压值。如果无法实现0.001英寸水位表的负压值，也不能通过增加流量差额(在通风系统允许范围内)实现，则应仔细检查该房间是否存在缝隙(例如门缝、窗缝、水管装置和各种嵌入墙壁的装置等)，然后采取补救措施，密封这些裂缝。
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